病毒核酸检测的原理,简单来说就是新冠肺炎病毒是一种仅含有RNA的病毒,其基因序列具有***性,通过一种基因测序仪器完成对病毒全基因组序列的解析,对每一个疑似患者,测出其病毒基因序列,同新冠肺炎病毒基因序列对比,就能知道该患者是否感染新冠肺炎病毒。该方法的结果准确度高。
基因测序行业,按照业务范围可分为四大类(见下图),下面作详细介绍:
PCR(聚合酶链式反应)设备,是PCR实验室中要放置的整套仪器。酶是基因测序过程中必不可少的材料。PCR设备包括移液器组(可以移0.5ul-1000ul,1ul就是1毫升的千分之一)、TGL-16.5M 台式高速冷冻离心机(参考数据:http://www.lxylxj.com/lixinji/TGL-16.5M.html)、基因分析仪、超纯水装置、荧光定量PCR仪、恒温器等,这些仪器都是高端精密仪器,其性能对测序结果至关重要。
台式高速冷冻离心机是提取新冠病毒RNA核酸的配套仪器,协和医院近期发布了新冠病毒操作指南,供有条件的实验室参考,操作人员在进入试剂配置区或者单独的洁净实验室需要遵循实验流程。
1、试剂区准备:洗液AW1、洗液AW2和Carrier RNA
根据说明说要求,在AW1中加入无水乙醇130mL,在AW2中加入无水乙醇160mL,计入无水乙醇后及时做好标记,在310μg的Carrier RNA中加入310μL AVE,并颠倒混匀使Carrier RNA充分溶解,就此完成洗液AW1、洗液AW2和Carrier RNA配置,而后通过传递窗传送到样本处理区,或者由专人送到核酸提取实验室中。
2、样本的裂解
用1.5ml的无菌EP管,移液器移取560μl AVL裂解液,加入5.6μl Carrier RNA,加入140μl的已灭活的待提取核酸的待测样本,涡旋振荡15s,室温静止10min。将上述EP管放入离心机内瞬时离心以去除可能残留在EP管盖上的裂解产物,防止污染。裂解完成后,加入560μl无水乙醇,振荡混匀15s,将上述EP管放入离心机内瞬时离心以去除可能残留在EP管盖上的裂解产物,防止污染。
向离心柱加入裂解产物630μl,8000转离心1min,若离心机在生物安全柜之外,每次使用都需进行外表面消毒。更换新废液收集管,要从离心机中小心取出离心柱,将上层离心柱转移到新收集管中,继续将剩余裂解产物630μl加入离心柱中,若样本体积大于140μl时需重复此步骤,直到全部裂解产物都过柱离心,8000转离心1min,小心将离心柱转移到新的收集管中。
取500μl AW1加入离心柱中(注意,此处加样操作时务必将移液器吸头接触离心柱内壁缓慢加样),8000转离心1min。小心取出离心柱,更换新的收集管。
取500μl AW2加入离心柱中,14000转离心3min,小心取出离心柱,更换新的离心柱上端收集管,置于离心机中使用***大转速离心1min,以确保将AW2中的残液完全离心干净。
取无菌1.5mlEP管收集核酸,将离心柱上端小心放入1.5mlEP管中,取40-60μl的洗脱液AVE加入到离心柱中(注意:洗脱液应尽量全部覆盖住离心柱膜),用EP管管盖盖住离心柱,使用无菌剪刀剪去原离心柱管盖。
室温静止1min,将其放入离心机中8000转离心1min,回收核酸。丢弃离心柱,EP管中即为获取的提取核酸,做好标记与登记。
近日,国家药监局再次应急批准1个新冠病毒核酸快速检测产品,进一步服务于疫情防控需要。新冠肺炎疫情发生以来,国家药监局已经应急批准了23个新型冠状病毒检测产品,其中新冠病毒核酸检测试剂15个,抗体检测试剂8个。
为了让更多更快速更准确的新冠试剂产出,各大企业都在抓紧时间扩大生产,上海卢湘仪推出GL-21M高速冷冻离心机(参考数据:http://www.lxylxj.com/lixinji/GL-21M.html)为新冠试剂生产商助上一臂之力。
GL-21M高速冷冻离心机是一款专门针对转速高需求的客户设计,可广泛应用于临床医学、生物工程、基因工程、制药、高校等领域的高速冷冻离心机,该机器采用食用级硅橡胶整体式密封圈,符合GMP认证标准,为保证试剂安全有效提供保障。